根據(jù)用戶實驗需求,此次實驗取小鼠視網(wǎng)膜作為樣品組織,對其進行制備獲取單細胞懸液,以便進行后續(xù)的單細胞測序
實驗設備:單細胞懸液制備儀 JX-CKSM-4WK
制備小鼠視網(wǎng)膜單細胞懸液的實驗操作步驟:
1.在實驗開始前,需要提前準備好單細胞制備儀一臺,實驗耗材以及小鼠樣本等
2.把實驗用到的消化酶和終止液進行提前冰浴解凍
3.打開熱板加熱和模塊加熱,將設備加熱到37℃
4.小鼠處死后,在顯微鏡下的幫助下取出小鼠視網(wǎng)膜
5.把小鼠視網(wǎng)膜經(jīng)過DPBS清洗后,放入消化管中,再加入消化酶,上機靜置3min后使用程序2進行消化
6.待儀器程序結束后取出,即可使用40μm篩網(wǎng)過濾
7.進行后續(xù)實驗的離心、裂紅、重懸
實驗操作注意事項:
1.清洗使用沒有Ca2+和Mg2+離子的DPBS
2.需要在實驗開始前提前將儀器加熱,把酶和終止液提前解凍
3.后續(xù)做單細胞測序的單細胞懸液過濾需要使用40μm篩網(wǎng)進行應用
實驗操作圖:
小鼠視網(wǎng)膜單細胞懸液制備的實驗結果圖(臺盼藍鏡檢):