近日,應(yīng)河南某附屬醫(yī)院客戶的實(shí)驗(yàn)需要,選用上海凈信單細(xì)胞懸液制備儀6通道設(shè)備對(duì)人源化模型小鼠肝臟組織樣品的原代細(xì)胞提取做流式實(shí)驗(yàn),以便后續(xù)對(duì)組織樣品的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)指標(biāo)在細(xì)胞水平的表達(dá)。
實(shí)驗(yàn)前處理設(shè)備:單細(xì)胞懸液制備儀6通道
小鼠肝臟組織樣品前處理懸液制備的實(shí)驗(yàn)步驟:
1.儀器準(zhǔn)備:需要提前準(zhǔn)備好單細(xì)胞制備儀器;將組織消化液終止液保存于-20℃,提前取出冷水解凍備用;再打開儀器電源,設(shè)置37℃管架加熱和模塊加熱
2.樣品準(zhǔn)備:客戶小鼠解剖取出肝臟組織,生理鹽水洗凈血水
3.實(shí)驗(yàn)制備操作步驟:使用眼科剪將樣品組織剪碎成1mm左右的小塊,放置于樣品管中,再加入組織消化液擰緊(加滿避免氣泡);先放置于儀器管架中37℃預(yù)熱幾分鐘,然后將其轉(zhuǎn)移至運(yùn)行模塊中,合上儀器蓋;根據(jù)樣品實(shí)驗(yàn)需求對(duì)其儀器運(yùn)行程序參數(shù)進(jìn)行調(diào)節(jié)設(shè)置,啟動(dòng)儀器
4.儀器程序運(yùn)行結(jié)束后,即可取出樣品管觀察組織塊,這時(shí)會(huì)發(fā)現(xiàn)組織塊已經(jīng)幾乎全部消化成渾濁的細(xì)胞懸液,再用濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,加入終止液終止消化,然后進(jìn)行離心,取出離心后的樣品管,然后棄上清即為我們所需的單細(xì)胞,加入PBS用于后續(xù)的流式標(biāo)記檢測(cè)
5.實(shí)驗(yàn)結(jié)果:樣品組織塊消化效果完好,細(xì)胞量充足,符合客戶需要
小鼠肝臟組織樣品前處理懸液制備實(shí)驗(yàn)效果:
單細(xì)胞懸液制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代單細(xì)胞細(xì)胞懸液制備設(shè)備,可用于流式細(xì)胞術(shù)/單細(xì)胞測(cè)序/原代細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn);實(shí)驗(yàn)設(shè)備具有起始組織量小,時(shí)間短,細(xì)胞得率高,細(xì)胞活性高的特點(diǎn),儀器使用方便,性能穩(wěn)定,對(duì)樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態(tài)。