實驗目的:此次實驗室樣品為小鼠肺組織,通過實驗前處理制備儀器對肺組織樣品單細胞懸液的制備,為便于后續(xù)更詳細的了解生物樣品的基因表達、蛋白質水平、代謝狀態(tài)等信息。
實驗設備:單細胞懸液制備儀 JX-CKSM-12WK
小鼠肺組織樣品的前處理實驗研磨過程:
1.選取健康小鼠1只,斷頸處死,打開腹腔,取出肺器官
2.用1XPBS洗滌肺器官
3.選取28.5mg肺組織,用眼科剪剪成糊狀
4.放入加滿消化液的離心管中
5.放入單細胞懸液制備儀的管架上,管架預熱5分鐘
6.選擇模塊4進行實驗,實驗結束后儀器自動停止
7.用70um濾網(wǎng)過濾,加入終止液終止消化
8.放到離心機上重懸,棄掉上清,加入少量PBS打散混勻底部沉淀細胞
9.吸取200ul單細胞懸液,加入PI避光染色10分鐘。進行后續(xù)實驗
實驗操作注意事項:
1. 機器使用時應保證位置放置平穩(wěn)。
2. 機器適合短時、間歇工作,請勿長時間連續(xù)使用,工作時間建議不超過 8 小時。
3. 為保護機器內(nèi)部的電路和機械,禁止用流水沖洗,而只能用濕布擦拭?! ?/p>
4. 使用過程中如有任何異常,應立即斷電,交由專業(yè)人員處理?! ?/p>
5. 機器需要放置在平整的實驗臺上,以防設備工作時振動?!?/p>
6. 一定要時刻保持警惕狀態(tài),請一切檢查好之后再開啟動。
小鼠肺組織樣品的前處理實驗研磨前后效果圖:
單細胞懸液制備儀對小鼠肺組織樣品的前處理實驗制備效果很好,細胞活率達到98.67%;通過制備小鼠肺組織樣品的單細胞懸液,可以將樣品肺組織中的細胞分散為單個細胞,并保持其完整的細胞膜和細胞器結構;通過單細胞懸液的制備,可以助力實驗研究人員對每個單細胞進行實驗分析,更詳細的了解其樣品組織的基因表達、蛋白質水平、代謝狀態(tài)等信息。
單細胞制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代細胞懸液制備設備,應用于流式細胞術/單細胞測序/原代細胞培養(yǎng)等實驗,具有起始組織量小,時間短,細胞得率高,細胞活性高的特點;對不同組織的制備均可達到90%以上的活率。