實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>本次實(shí)驗(yàn)對(duì)象是小鼠肺組織,經(jīng)過單細(xì)胞制備儀制作后用流式細(xì)胞檢測(cè)活細(xì)胞得率。
樣品介紹:細(xì)胞樣品的制備在流式細(xì)胞檢測(cè)過程中十分重要,獲取活性高、完整性好的的單細(xì)胞懸液可以大幅度提高實(shí)驗(yàn)的效率和成功率。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備:單細(xì)胞懸液制備儀 JX-CKSM-WK系列
小鼠肺組織的前處理實(shí)驗(yàn)操作過程:
步驟一:手動(dòng)將運(yùn)行模塊(樣品槽)移至加熱模塊一側(cè),打開電源開關(guān),點(diǎn)擊熱板模塊加熱和運(yùn)行模塊加熱,靜待5分鐘左右使模塊溫度上升至所需溫度,一般為37.5°C。
步驟二:將要研磨的小鼠肺組織樣品剪成 1mm 以下的小塊放入專用配套樣品試管中,加入消化液,消化液要盡量加滿,避免試管中有氣泡。
步驟三:將要研磨的小鼠肺組織樣品剪成 1mm 以下的小塊放入專用配套樣品試管中,加入消化液,消化液要盡量加滿,避免試管中有氣泡。
步驟四:將試管從預(yù)熱模塊中取出放入運(yùn)行模塊中
步驟五:合上儀器蓋,選定程序,點(diǎn)擊啟動(dòng),運(yùn)行半小時(shí)左右,程序停止后一會(huì)兒開蓋觀察試管中樣品的消化情況,若還有大塊組織存在,可以自定義程序選擇8000rpm,1min啟動(dòng)。
步驟六:待消化液運(yùn)行完后取出樣品,上下振蕩樣品管十下,觀察渾濁度和顏色,過細(xì)胞篩網(wǎng)后加入終止液即是單細(xì)胞懸液。
實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
1.消化酶和終止液均需要在冷凍環(huán)境下保存。
2.消化酶解凍時(shí)需要在常溫條件下解凍,不可以放入水浴或者其它加熱儀器中解凍,溫度升高對(duì)酶的活性會(huì)有很大的影響。
4.單次樣品量不要超過研磨管內(nèi)珠子的大小。
5.程序運(yùn)行結(jié)束后不要立馬取出樣品,可以稍等一分鐘后再取出。
小鼠肺組織的前處理的實(shí)驗(yàn)結(jié)果:上流式測(cè)細(xì)胞活率為96.8%,滿足實(shí)驗(yàn)需求
小鼠肺組織樣品的前處理研磨實(shí)驗(yàn)前后效果圖
上海凈信單細(xì)胞懸液制備儀能夠快速完成組織到單細(xì)胞的過程,降低細(xì)胞逆境時(shí)間,提高細(xì)胞存活率。總的來說,凈信單細(xì)胞懸液制備儀具有組織高利用率、單細(xì)胞化過程高效、細(xì)胞活性高的特點(diǎn),常應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)/單細(xì)胞測(cè)序/原代細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)。