近期,Nature Methods發(fā)表了數(shù)篇關(guān)于大規(guī)模單細(xì)胞測序儀相關(guān)文章,包括文庫制備、測序方法、分析方法等,這里介紹其中的幾篇。
一:Scalable whole-genome single-cell library preparation without preamplification
文章介紹了直接文庫準(zhǔn)備(DLP)方法,一種穩(wěn)定、可擴(kuò)展、高保真的方法。用納升體積的轉(zhuǎn)位反應(yīng)制備單細(xì)胞全基因組文庫,不需要預(yù)擴(kuò)增。文章檢測了782個細(xì)胞,結(jié)果表明,與現(xiàn)有方法相比,低深度測序顯示出更大的均一覆蓋度和更可靠的拷貝數(shù)變化。
二:Effective detection of variation in single-cell transcriptomes using MATQ-seq
文章報道了一種高靈敏度的單細(xì)胞測序儀總RNA定量測序方法,即利用多重退火和基于dC尾定量的單細(xì)胞RNA測序方法(MATQ-seq)。文章用該方法獲得了單細(xì)胞測序儀全轉(zhuǎn)錄組之間的生物學(xué)變異。
三:Sequencing thousands of single-cell genomes with combinatorial indexing
文章提出了單細(xì)胞測序儀胞組合標(biāo)引測序方法(SCI-seq),同時產(chǎn)生成千上萬個單細(xì)胞文庫,檢測體細(xì)胞拷貝數(shù)變異。文章構(gòu)建了16698個單細(xì)胞文庫,包括培養(yǎng)細(xì)胞系、靈長類前額皮質(zhì)組織和兩個人類腺癌組織,并詳細(xì)分析了胰腺腫瘤亞克隆變異。
四:Single-cell mRNA quantification and differential analysis with Census
本文作者將人口普查算法引入RNA-seq數(shù)據(jù)分析,將相對RNA-seq表達(dá)水平轉(zhuǎn)換為相對轉(zhuǎn)錄量,而不需要加標(biāo)對照。該方法能顯著提高準(zhǔn)確度。
五:Massively multiplex single-cell Hi-C
該篇文章針對染色體的結(jié)構(gòu),提出了基于多重標(biāo)引的單細(xì)胞測序儀Hi-C技術(shù)。